果膠甲酯化程度可見分光光度法檢測試劑盒 返回列表頁

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分，除了起結構支撐、物質運輸?shù)茸饔猛猓€具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。

測定原理

果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇，甲醇與2,4-戊二酮反應顯色，在412nm下測定吸光值；同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基反應產生有色物質，在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

四己基氫銨 用于離子色譜, ≥99.0% (T)N,N'-二環(huán)己基碳二亞 99.0%Anti-CD74/MHC II  CD74抗體

N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 99%N,N'-琥珀酰亞基碳酸酯 98%Anti-CLEC2D/OCIL  CLEC2D蛋白抗體

N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 97%4-二甲吡 99%Anti-CD80/B7-1  激分子B7-1蛋白抗體

2,4,5-三氯苯 分析標準品,99%4,4'-二甲氧基三苯基氯 98%Anti-CD71/TFR  轉鐵蛋白受體抗體

1,2,3,4-四氯苯 分析標準品,98%4,5-二基咪唑 98%Anti-B7-1/CD80  激分子B7-1蛋白抗體

5-硫代-D-葡萄糖 96%4,5-二基咪唑 99%Anti-CD73  胞漿-5′-核苷酸-Ⅱ抗體

三溶液 50%溶液二吡咯烷基(N-琥珀酰亞氨氧基)碳六氟鹽  98%Anti-CD79A/IGBP-1  球蛋白結合蛋白-1抗體

二十三烷 分析標準品,99.5%4-(4,6-二甲氧基三)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽 97%Anti-CD82/KAI1  腫瘤轉移抑制蛋白1抗體

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