黃曲霉毒素B1的快速檢測方法及其重要性

來源：山東盛泰儀器有限公司 2026年04月18日 15:24

黃曲霉毒素，具有穩定、耐高溫特性，可于長波紫外光下產生熒光，根據熒光顏色、RF值及結構不同等分為B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、R1、GM、毒醇。

AFT難溶于水、乙烷、石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙腈和二甲基甲酰胺等有機溶劑。AFT可在PH1～3的酸性溶劑中稍分解，PH9～10溶液中迅速分解破壞，遇堿可迅速分解，在PH9～10堿性溶液中可分解為幾乎無毒的鹽，可在酸性條件下還原。

實驗目的

黃qu霉素是泛指一些由真菌產生的強毒性致癌類物質，短期攝入高劑量（1㎎/kg體重）可導致急性中毒，常見發熱、嘔吐、黃疸等肝功能異常癥狀或肝壞死，長期低劑量（20微克/千克體重）暴露會顯著增加肝癌、胃癌等患病風險，因其廣泛存在于農作物與食物中，并對人體和動物危害巨大，故而建立快速、準確的檢測方法對保障食品安全與公共健康具有重要意義。

本實驗旨在通過固相酶聯免疫吸附ELISA的原理，即酶聯免疫法、定量測定樣品中黃曲霉毒素B1的含量，為食品污染風險評估提供科學依據。

實驗儀器

①ST-2000A 霉菌毒素測定儀

②玉米、均質器、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）、微量移液器、甲醇、正己烷、二氯甲烷試劑

實驗步驟

①檢查實驗所用器材，確保其干凈干燥無污染

②甲醇、去離子水以7：3比例配取樣品提取液

③取粉碎玉米樣品2g，放于50ml離心管，加5ml樣品提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉/分離心10分鐘，結束后取0.5ml上清，加入0.5ml去離子水，混勻

④將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min，搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，并用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

⑤將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應30分鐘。

⑥揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干

⑦每孔加入底物液A（50µl），再加底物液B（50µl），振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

⑧每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應。

⑨用黃qu霉素測定儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成

⑩儀器完成測定，自動給出結果

實驗結果

經檢測，該樣品的黃曲霉毒素約為0.19ug/kg，滿足GB 2761-2017標準。

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